在細(xì)胞培養(yǎng)中控制的許多變量中，一個(gè)特定的變量會(huì)影響整個(gè)實(shí)驗(yàn)：污染。細(xì)胞污染的一個(gè)影響因素并不總是在雷達(dá)上，盡管它可以默默地影響細(xì)胞健康并影響測(cè)量數(shù)據(jù)，但它是移液污染。

在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)時(shí)，移液器、移液器吸頭和移液程序的選擇很少受到關(guān)注。即使是避免移液污染的一攬子解決方案（高壓滅菌）也可能不像通常認(rèn)為的那樣有效。

細(xì)胞培養(yǎng)的第一條規(guī)則：避免污染。為什么無(wú)菌技術(shù)對(duì)于成功的細(xì)胞培養(yǎng)如此重要？

無(wú)菌技術(shù)是獲得可靠和可重復(fù)結(jié)果的唯一方法。污染會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)、新陳代謝和健康——這正是科學(xué)家們有興趣研究的東西。受污染的細(xì)胞系不具有所需的特性，并且它們每次的功能都不同，具體取決于污染的嚴(yán)重程度。此外，如果污染物使您感興趣的細(xì)胞過(guò)度生長(zhǎng)，您最終可能會(huì)研究錯(cuò)誤的生物體。  

科學(xué)家經(jīng)常遇到哪些類型的污染物？

常見(jiàn)的污染源是細(xì)菌、酵母菌和霉菌。在細(xì)胞培養(yǎng)工作中，最難檢測(cè)和根除的就是支原體。不太常見(jiàn)的污染類型包括，例如，實(shí)驗(yàn)室消耗品中的塑料可浸出物。

細(xì)胞污染的常見(jiàn)原因有哪些？

污染的常見(jiàn)來(lái)源是不良的移液操作，例如使用受污染的移液器和非過(guò)濾器吸頭。此外，缺乏良好的實(shí)驗(yàn)室實(shí)踐也是一個(gè)問(wèn)題，例如，對(duì)培養(yǎng)箱或?qū)恿鞴竦葍x器的去污不充分。要去除支原體，需要使用 0.1 μm 而不是 0.2 μm 過(guò)濾器進(jìn)行過(guò)濾。

三種移液污染：

1. 移液器到樣品污染： 移液器或移液器吸頭污染了樣品。

如何避免：

使用經(jīng)過(guò)消毒的過(guò)濾芯吸頭，以防止移液器主體受到污染。

每次樣品后更換移液器吸頭。

定期用乙醇對(duì)移液器進(jìn)行高壓滅菌或消毒。選擇與高壓滅菌器兼容的移液器。

2. 樣品到移液器污染：移液 樣品進(jìn)入移液器主體，污染移液器。

如何避免：

使用過(guò)濾器吸頭或正位移吸頭防止樣品進(jìn)入移液器主體。

移液時(shí)，將移液器保持在垂直位置。將移液器豎直存放。

移液時(shí)傾斜瓶子。

緩慢松開(kāi)按鈕，避免樣品飛濺進(jìn)入移液器。選擇配備軟彈出功能的移液器。

3. 樣品間污染： 殘留的移液樣品被轉(zhuǎn)移到下一個(gè)樣品。通常在多次使用相同的吸頭時(shí)發(fā)生。

如何避免：

每次樣品后更換移液器吸頭。

使用過(guò)濾器吸頭或正位移吸頭防止樣品進(jìn)入移液器主體，并進(jìn)入下一個(gè)樣品。

確保移液器吸頭在移液器上密封，以避免樣品泄漏。例如， 永岳醫(yī)療的吸頭。

有沒(méi)有科學(xué)家甚至可能不知道的污染因素？

 高壓滅菌的效率通常不會(huì)得到驗(yàn)證，如果高壓滅菌器不能正常工作，高壓滅菌的移液器吸頭可能不是無(wú)菌的。包裹在保護(hù)包裝中的預(yù)滅菌過(guò)濾嘴是防止此類意外的最安全選擇。定期對(duì)優(yōu)質(zhì)移液器吸頭的預(yù)滅菌過(guò)程進(jìn)行驗(yàn)證，以確保預(yù)滅菌的效率。

移液和分液工具如何使科學(xué)家能夠在無(wú)菌環(huán)境中更輕松地處理樣品？

選擇正確的移液器和移液器吸頭可以使無(wú)菌工作流程變得更加容易。永岳醫(yī)療移液器易于清潔和無(wú)需工具即可打開(kāi)，從而加快了日常清潔。由于高壓滅菌比用乙醇擦拭更有效地去除污染，賽多利斯機(jī)械移液器完全可高壓滅菌，這意味著您可以可靠地對(duì)移液器進(jìn)行凈化。軟吸頭彈出可防止吸頭彈出時(shí)飛濺引起的潛在污染風(fēng)險(xiǎn)。預(yù)先滅菌的過(guò)濾器吸頭可保護(hù)您的樣品免受交叉污染。永岳醫(yī)療吸頭也采用防漏包裝，這意味著儲(chǔ)存和交付條件下的任何污染都不會(huì)接觸到吸頭或吸頭盒。

科學(xué)家如何避免污染？您對(duì)無(wú)菌工作有哪些重要建議？

首先，良好的實(shí)驗(yàn)室實(shí)踐和對(duì)工作步驟的仔細(xì)規(guī)劃。確保僅將特定工作流程所需的東西保留在層流柜中，并同時(shí)使用一種細(xì)胞培養(yǎng)物。此外，定期檢測(cè)支原體等污染物可讓您高枕無(wú)憂，相信您的結(jié)果。在無(wú)菌條件下工作時(shí)，花在預(yù)先消毒的濾芯吸頭和無(wú)菌試劑上的錢(qián)是物有所值的。